酶联免疫法也就是ELISA法,它***用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。
EIA是临床实验室中叫做酶联免疫法,它***用的是抗原与抗体相结合发生特异性的反应,将待检测的标本与酶进行连接,然后通过酶与底物发生颜色反应测量定量的抗原或者抗体,该检测可以检测抗原也可以检测抗体。临床中大部分用于诊断的抗原或抗体检测,都***用的是酶联免疫法。
酶联免疫吸附剂测定法,简称酶联免疫法,或者ELISA法。 它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤 ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内)。
酶链免疫吸附化验是平板化验法用于探测和确定某些物质的数量,比如肽,蛋白质,抗体,和荷尔蒙。另有名称,比如 酶免疫化验(EIA)指的是同一种试验。酶联免疫检测法(PSTVd除外)全过程包括病毒抗原的分离与纯化、病毒抗血清的制备和抗血清反应3个环节。
1、外标法与内标法,是两种不同类型的定量分析方法。外标法,基于标准样品的标准曲线来计算未知样品的浓度。其操作简单,是常用的定量计算方法。然而,外标法存在一定的局限性,尤其是在样品浓度变化较大或者基体效应明显的情况下,其准确性受到质疑。与外标法相对应的是内标法。
2、内标法的实验过程中更关注未知样品的校正曲线制定过程;外标法则使用纯样品的准确信息直接比对定量结果。相对来说,外标法的实验操作简便快速。内标法在仪器的使用性能及数据处理上相对更为复杂,但也具备更好的定量准确性。两种方法的适用性在不同场景及不同检测物质的需求中有所不同。
3、方法不同 内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积及相对校正因子。外标法是按梯度添加一定量的标准品于空白溶剂中制成对照样品,与未知试样平行地进行样品处理并检测。
4、外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度,分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近,以利于定量分析的准确性。简单的说:内标法就是用在样品中定量加入你要分析的物质,通过测得的实际样品量和加入样品量的比值来定量所要分析的样品含量。内标法主要优点是简单,快速。
5、两种方法在选择内标物和样品处理上有所不同。内标法要求内标物的选择需遵循一定的原则,适用于样品量较少的情况,只要内标物和待测组分能分离且出峰即可。而外标法则要求仪器具有较高的重复性,适用于大量样品分析。由于仪器使用过程中会有所变化,因此需要定期进行曲线校正。
6、内标法是把标准物质加入到被测样品中,外标法并不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定。内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。
1、②试管凝集试验是一种定量法,用于测定被检血清或其他体液中有否某种抗体及其效价,可做临床的辅助诊断,或用于流行病学监测。在猪场中,本法常用于猪布氏杆菌病的诊断。
2、常用直接涂片法和饱和盐水浮集法。(2)猪的血液常规检查法① 血红蛋白含量测定健康猪血红蛋白值为5克/100毫升(波动范围5~12克/100毫升)。血红蛋白含量增多,见于剧烈的腹泻、呕吐、大出汗及某些中毒病。血红蛋白含量降低,见于仔猪贫血及各种慢性消耗性疾病,如慢性猪瘟、仔猪蛔虫病等。
3、猪病诊断通常***用四种主要方法:临床诊断、流行病学诊断、病理学诊断和微生物学诊断。 这些方法相互关联,互相补充,各自具有独特性,共同构成诊断过程中的桥梁。 临床诊断主要针对个体病猪,通过全面的体检和体温测量等进行快速诊断。
4、猪病常用临诊诊断、流行病学诊断、病理学诊断和微生物学诊断4种诊断方法。它们之间相互联系,互为补充,各有特色,彼此间都起着一种桥梁作用。各种诊断方法的特点简介如表5。
5、pcr与病毒分离鉴定相比,具有快速、敏感、特异性强等优点,能同时检测大批量的样品,并且能进行活体检测,适合于临诊诊断。血清学血清学诊断多种血清学方法可用于伪狂犬病的诊断,应用最广泛的有中和试验、酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、补体结合试验及间接免疫荧光等。
6、死亡率可达60﹪~80﹪;小猪有神经症状;慢性猪病,体温时高时低,食欲时好时坏,便秘与腹泻交替发生,病猪明显消瘦、毛焦臁糜,行走不稳。一般病程可达20天或以上,死亡居多。
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